反相鍵合相色譜儀色譜柱的選擇要求包括選擇性合適、色譜峰形良好、重現(xiàn)性好和應用范圍寬等。
一、選擇性合適:
滿足不同的分離要求。
由于硅羥基的影響,許多情況下硅膠基質(zhì)對整個鍵合相的性能起決定作用。內(nèi)嵌極性基團鍵合相在使用高比例水溶液流動相時,色譜性能穩(wěn)定。
二、色譜峰形良好:
滿足定量精度、靈敏度和分離度要求。
1、定量結果更準確、更精確:
(1)純度分析。
(2)穩(wěn)定性分析。
2、靈敏度更高:
檢測下限更低,對低濃度雜質(zhì)有更強的檢測能力。
3、分離度更好:
更有利于相鄰色譜峰的分離。
三、重現(xiàn)性好:
重現(xiàn)性是液相色譜分析的基本要求。
1、色譜柱間重現(xiàn)性:
指同一批次合成的填料之間的重現(xiàn)性。
(1)柱床填充質(zhì)量控制:
1)理論塔板數(shù)。
2)色譜峰對稱。
3)柱反壓。
(2)無選擇性差異。
2、色譜柱批次間重現(xiàn)性:
指不同批次合成的填料之間的重現(xiàn)性。
(1)顆粒的物理性質(zhì)。
(2)顆粒表面的化學性質(zhì)。
四、應用范圍寬:
1、pH值范圍寬:
(1)pH>8時,許多C18硅膠基質(zhì)由于填料顆粒溶解,色譜柱內(nèi)產(chǎn)生空隙,會過早地失去柱效。隨著鍵合相覆蓋率的增加,色譜柱壽命會延長。
(2)pH<2時,許多C18硅膠基質(zhì)由于鍵合相的水解作用,會過早地失去柱效。使用三官能團鍵合相可獲得最佳穩(wěn)定性。
2、高溫穩(wěn)定性。